TCEP即TCEP-HCl，全稱Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride，中文名為三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽。分子式為C9H15O6P·HCl，分子量為286.65。本產(chǎn)品在大多數(shù)情況下可以作為DTT的替代物使用。
本產(chǎn)品為白色粉末，純度≥98%，易溶于水，最高可達(dá)310mg/ml (1.08M)，在有機(jī)溶劑如乙醇、甲醇等中溶解度較小。TCEP直接溶解在水中時的pH約為2.5。
      TCEP是一種高效、無異味、不含硫醇基的水溶性還原劑，可選擇性還原多肽或蛋白質(zhì)中的二硫鍵。TCEP具有更佳的穩(wěn)定性、更廣的兼容性、更強(qiáng)的還原性、更好的選擇性，而且由于不含巰基，因此在多數(shù)應(yīng)用中不必去除，從而廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)中，特別是在蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)中，是公認(rèn)的DTT的良好替代物。
      TCEP對還原二硫鍵選擇性極強(qiáng)，除半胱氨酸外，幾乎不會與其它氨基酸有反應(yīng)，并且能在更寬的pH值范圍包括酸性條件下使用，從而有效減少酰胺鍵的水解。TCEP的反應(yīng)活性溫和、易溶、毒性小，且更容易操作，在酸性、堿性溶液中的穩(wěn)定性都很好。
      TCEP使用范圍廣泛，無論是普通的SDS-PAGE中蛋白的還原，還是一些特殊的實驗如固相金屬離子親和層析(IMAC)、質(zhì)譜、Ni柱純化等其它需要還原二硫鍵的實驗，也特別適用于組氨酸標(biāo)記蛋白純化、馬來酰亞胺偶聯(lián)半胱氨酸殘基反應(yīng)，它能夠預(yù)防半胱氨酸殘基形成二硫鍵，但不像DTT或β-巰基乙醇本身易與馬來酰亞胺反應(yīng)。
      TCEP的特點(diǎn)有：無氣味——與DTT和β-巰基乙醇不同，TCEP是無異味的，有助于創(chuàng)造更加健康的實驗室環(huán)境；高效——5到50mM 的TCEP在數(shù)分鐘內(nèi)即可完全還原大多數(shù)多肽或蛋白的二硫鍵(與DTT等效)；特異性——選擇性的完全還原甚至最穩(wěn)定水溶液中的烷基化二硫鍵；快速——在室溫和pH5的條件下，不到五分鐘即可還原蛋白的二硫鍵；穩(wěn)定——耐空氣氧化，無揮發(fā)性，與蛋白的其它功能基團(tuán)不反應(yīng)；通用性——可在廣泛pH范圍、鹽、去垢劑、溫度條件下還原多肽和蛋白；兼容性——不含巰基，因此在多數(shù)應(yīng)用中不必去除還原試劑。
 在SDS-PAGE電泳中，一般終濃度在25mM左右的TCEP即可足夠還原蛋白樣品。
保存條件：
      -20℃或4℃保存，至少2年有效。室溫保存，至少一年有效。
注意事項：
      本產(chǎn)品在磷酸鹽緩沖液中，尤其在中性或堿性磷酸鹽緩沖液中很不穩(wěn)定。因此若實驗過程需將本產(chǎn)品配制在PBS緩沖液中使用，必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
      大多數(shù)蛋白無需變性劑即可高效還原，但加入鹽酸胍等變性劑有助于將內(nèi)部二硫鍵暴露而易于和TCEP發(fā)生反應(yīng)。
      不建議使用尿素作為變性劑，避免形成氰酸酯并與巰基反應(yīng)。
      盡量防止金屬接觸TCEP溶液，否則會一定程度降低TCEP活性。在還原過程中向樣品緩沖液中加入5至20mM EDTA有助于防止巰基被二價金屬離子氧化，如Zn2+、Cu2+和Mg2+等。
      還原后樣品應(yīng)盡快使用，長時間放置后會重新生成二硫化物。
      本產(chǎn)品在溶液中帶電荷，因此不適用于等電聚焦(IEF)實驗。
      TCEP對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
      本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。