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其它常用酶

Horseradish Peroxidase (High Purity, ≥340U/mg)

Horseradish Peroxidase (High Purity, ≥340U/mg)

產(chǎn)品編號(hào): D2369-500mg


品牌:ALPHABIO


CAS號(hào):


產(chǎn)品包裝: 500mg


產(chǎn)品價(jià)格:¥9772.00


詳細(xì)介紹

Horseradish Peroxidase (HRP),也稱Peroxidase (POD) from Horseradish,即辣根過氧化物酶,EC號(hào)1.11.1.7,是從植物辣根(horseradish)中提取得到的一種含有血紅素的氧化還原酶,以過氧化氫或其它有機(jī)過氧化物為電子受體催化氧化多種有機(jī)物和無機(jī)物底物。本產(chǎn)品的酶活性≥340U/mg。
本產(chǎn)品用途廣泛。由于HRP分子量較小且穩(wěn)定,并且HRP本身的糖基化修飾使其非特異性結(jié)合非常低,所以常用于標(biāo)記二抗、一抗或Streptavidin等而用于Western blot、ELISA、免疫組化等檢測(cè),HRP也常用于一些生化檢測(cè)。
本產(chǎn)品為棕褐色粉末狀的高純度HRP。本產(chǎn)品呈現(xiàn)棕褐色是由于HRP中含有血紅素輔基導(dǎo)致的,并非由于純度不高導(dǎo)致的。本產(chǎn)品RZ≥3,酶活性≥340U/mg,溶解度≥10mg/ml。RZ (Reinheitszahl)定義:HRP分子中的血紅素輔基在403nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰,而去輔基的HRP在275nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰,A403/A275比值即為RZ值,RZ值僅反映了血紅素含量,并不代表酶活性的高低,高純度HRP的RZ值應(yīng)在3.0左右。酶活力單位定義:20℃,pH6.0條件下反應(yīng)20秒,氧化鄰苯三酚(pyrogallol)得到1.0mg紅棓酚(purpurogallin)所需的酶量定義為一個(gè)活力單位。
HRP是一種含四個(gè)二硫鍵的單鏈多肽,由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉(ferroprotoporphyrin)結(jié)合而成的糖蛋白,分子量約44kDa,包括多肽鏈(33890Da)、血紅素(約700Da)和糖類物質(zhì)(約9400Da),其中碳水化合物含量達(dá)18%。不同HRP同工酶中包含的糖類物質(zhì)有所不同,主要包括半乳糖、阿拉伯糖、木糖、海藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺等。目前已發(fā)現(xiàn)至少有7種HRP同工酶,不同同工酶的等電點(diǎn)大約在3.0-9.0之間。
HRP的作用機(jī)理:HRP與過氧化氫結(jié)合,得到的[HRP-H2O2]復(fù)合物能夠使多種氫供體底物發(fā)生氧化,而供氫體底物大多為無色的還原型顯色底物(chromogenic substrate,如DAB、TMB、ABTS等)、化學(xué)發(fā)光底物(chemiluminescent substrate,如luminol等)和熒光底物(fluorogenic substrate,如Amplex Red等),通過反應(yīng)可生成氧化型的有色染料、化學(xué)發(fā)光或熒光產(chǎn)物,最終通過適當(dāng)儀器進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。
HRP常通過二硫鍵介導(dǎo)的戊二醛交聯(lián)、過碘酸氧化法及氨基和巰基直接介導(dǎo)的交聯(lián)等多種方式對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記,HRP與β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)和堿性磷酸酶(alkaline phosphatase)相比具有更小的分子量和更高的穩(wěn)定性,因此HRP是三者中最為理想的抗體標(biāo)記物。
HRP最適pH在6.0-6.5之間,在pH5.0-9.0之間都處于穩(wěn)定狀態(tài)。HRP常見的抑制劑有疊氮化鈉、氰化物、L-胱氨酸、重鉻酸鹽、羥胺類物質(zhì)、釩酸酯、P-氨基苯甲酸和Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe2+、Mn2+、Ni2+、Pb2+等一些金屬離子。


保存條件:
4℃或-20℃避光保存,至少二年有效。
注意事項(xiàng):
收到本產(chǎn)品后請(qǐng)立即使用或按照說明書推薦的條件保存。隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng),酶活力會(huì)有一定程度的下降。
本產(chǎn)品為凍干粉,37℃存放2周后,酶活性能至少保持80%。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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